旋光仪测定旋光性溶液旋光率的方法
实验证明同一旋光物质对不同波长的光有不同的旋光率,在一定温度下,它的旋光率与入射光波长的平方成反比,即旋光率随波长减小而迅速增大。考虑到这一情况,通常采用钠黄光的线来测定。另外,旋光率还与温度有关,如:用589.3nm的钠黄光对蔗糖溶液测定旋光率时,在20℃附近,温度每升高或降低1℃时,蔗糖溶液的旋光率约减小或增加0.24°,通常测定的室温以20℃±2℃为宜。
三分视场在起偏镜和检偏镜相互垂直和平行时,三部分亮度才一致,但在两者相互平行时,三分视场的亮度较大,不容易观察微小的变化,一般采用起偏镜和检偏镜相互垂直时作为零度视场。
在测量时,先将旋光仪调节到起偏器和检偏器相互垂直,即找到零度视场,然后装上测试管,由于溶液具有旋光性,使线偏振光的振动面转过一个角度,则零度视场发生了变化。这时转动检偏镜,能找到亮度一致的视场,此时,线偏振光的振动方向与检偏器的偏振化方向相互垂直,这样检偏镜的旋转角度即为被测溶液的旋光度,它可以通过放大镜及读数盘读出,应该注意,测量时放入测试管前与后市场的情况应一致。
旋光仪的调整
1、调节旋光仪的目镜,使能看清视场中三部分的分解线
2、确定旋光仪的零点,观察并熟悉视场明暗变化的规律,找到视场亮度相等时的两个位置,取其亮度相等、整体较暗的一个位置,即是旋光仪的零点。记下此时此刻盘上的相应两个游标的读数。重复测定零点5次,得出检偏振器在刻度盘上零点位置的平均读数。